13種羰基衍生物HPLC方法
在工業空氣監測中，測定羰基（醛和酮）排放量對預防呼吸、肺病、自身免疫疾病和癌癥起到至關重要。 根據DIN ISO 16000-3中描述的分析方法，羰基必須用2,4-二硝基苯肼（DNPH）轉化為其相應的腙，以便通過UV檢測器檢測并通過反相HPLC分析。
Knauer諾爾液相解決方案
KNAUER AZURA HPLC plus 二元高壓梯度液相色譜系統，結合KNUAER自主的Eurospher II 100-3 DNPH色譜柱 ，參考DIN ISO 16000-3方法開發了一套完整的空氣中醛酮化合物的HPLC分析解決方案，可準確地對13種醛酮化合物進行定性定量分析。
AZURA HPLC plus 和 Eurospher II 100-3 DNPH色譜柱
3D立方體選項的色譜建模軟件
優化HPLC中方法主要目的是為皮實、、可重復、合適的分析條件。為了節省資源，計算機輔助開發方法是有價值的工具。為了表征空氣樣品中的羰基含量，通常使用13種醛和酮DNPH衍生物的標準混合物。為了分析，必須實現所有13個組件的良好分離。在這里，使用具有3D立方體選項的色譜建模軟件來優化碳酰基標準混合物的分析。對梯度時間、溫度、三元洗脫液組成的影響進行優化，此外，在計算機上研究了方法的可靠性，并通過實驗得到了高度一致的驗證。
13種羰基的色譜圖，用DNPH柱按 DIN ISO 16000-3法測定（優化前）
根據DIN ISO 16000-3的方法，僅能獲得11個色譜峰（見圖），丁烯醛-DNPH、2-丁酮-DNPH、甲基丙烯醛-DNPH、正丁醛-DNPH分離度不佳。
為了優化加快方法優化，本方案使用了色譜模擬軟件進行快速的方法優化。將所得的色譜圖輸入優化軟件，軟件給出方法優化建議，并根據軟件優化結果建立新的分離方案。
圖色譜模擬軟件給出的方法操作設計區域
12紅尖測量條件
優化后的方法如下：
流動相：A：雙蒸水；B：乙腈
梯度：0~16min（60% A + 40% B）→ 30~40min（40% A + 60% B）→ 41min（60% A + 40% B）→ 45min（60% A +40% B）
流速：1ml/min
柱溫：22℃
進樣體積：10µL
檢測波長：360nm
優化后分離效果如圖所示。
13種羰基（醛酮）化合物的標準色譜圖（優化后）
表 13種羰基（醛酮）化合物保留時間表
|
序號 |
化合物 |
保留時間 |
分離度 |
RSD% |
|
1 |
甲醛-DNPH |
7.47 |
- |
0.63 |
|
2 |
乙醛-DNPH |
10.92 |
8.78 |
0.65 |
|
3 |
丙酮-DNPH |
15.96 |
9.33 |
0.79 |
|
4 |
丙烯醛-DNPH |
17.63 |
2.69 |
0.47 |
|
5 |
丙醛-DNPH |
19.26 |
2.81 |
0.53 |
|
6 |
丁烯醛-DNPH |
23.08 |
8.17 |
0.17 |
|
7 |
2-丁酮-DNPH |
23.09 |
2.08 |
0.14 |
|
8 |
甲基丙烯醛-DNPH |
24.38 |
1.27 |
0.15 |
|
9 |
正丁醛-DNPH |
24.84 |
1.29 |
0.19 |
|
10 |
苯甲醛-DNPH |
27.94 |
9.30 |
0.12 |
|
11 |
戊醛-DNPH |
28.85 |
3.00 |
0.38 |
|
12 |
間甲基苯甲醛-DNPH |
30.81 |
6.66 |
0.10 |
|
13 |
己醛-DNPH |
32.14 |
4.35 |
0.18 |
關于 KNAUER AZURA HPLC plus
KNAUER AZURA HPLC plus系統是KNAUER新設計的高效液相色譜系統，采用模塊化的功能設計，可根據用戶需求，自由組合和定義HPLC的功能模塊，為操作人員帶來不一樣的分析體驗。AZURA HPLC采用的泵單元P6.1L可為您提供等度、二元高壓、四元低壓三種不同梯度形成方式。每種類型的泵都可以支持5ml、10ml泵頭相互更換，使您在一套系統即可實現UHPLC、HPLC的轉換，為您提供一機多用的解決方案。
AZURA® 可為用戶提供190-700nm的UV/VIS和190-1000nm范圍的DAD檢測器，并針對不用的分析任務，設計了多種不同規格的流通池，如用于常規HPLC分析的耐壓流通池和高靈敏度檢測的光導流通池。
關于KNAUER科學設備有限公司
成立于1962年的德國KNAUER公司是歐洲HPLC技術的先驅，也是歐洲個HPLC生產廠家。創始人Herbert Knauer博士20世紀60年代初期就致力于HPLC和層析技術的研發，從溶劑輸送系統，檢測器技術到分離柱和填料，都有其貢獻。目前，德國KNAUER公司的HPLC產品和服務遍布全球60多個，以其專業的技術和誠信的服務在行業中享有盛譽。KNAUER是LUMTECH品牌OEM的主要工廠。綠綿科技是Knauer中國區分析液相/色譜柱總代理。
關于綠綿科技
北京綠綿科技有限公司(簡稱：綠綿科技)以體現客戶服務價值為宗旨，以專業精神和技能為廣大實驗室分析工作者提供樣品前處理、樣品制備及分析、實驗數據精確分析和管理的全面解決方案，致力于協助客戶提高分析檢測的效率和水平。主要代理產品聯系電話：010-82676061/2/3/4/5/6/7/8
E-mail：info@lumtech.com.cn。
